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アイテム
麹菌用ジーントラップベクター, pPTR-EGFP1の作成
https://doi.org/10.24514/00002662
https://doi.org/10.24514/0000266204b67247-4802-43e7-8826-66a2a129bbd8
| 名前 / ファイル | ライセンス | アクション |
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nfri_report_No67p33-38p.pdf (518.8 kB)
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| Item type | 紀要論文01 / Departmental Bulletin Original Article(1) | |||||||||||||||||||||||||
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| 公開日 | 2019-12-20 | |||||||||||||||||||||||||
| タイトル | ||||||||||||||||||||||||||
| タイトル | 麹菌用ジーントラップベクター, pPTR-EGFP1の作成 | |||||||||||||||||||||||||
| タイトル | ||||||||||||||||||||||||||
| タイトル | Construction of a gene trap vector, pPTR-EGFP1, for the filamentous fungus, Aspergillus oryzae | |||||||||||||||||||||||||
| 言語 | en | |||||||||||||||||||||||||
| 言語 | ||||||||||||||||||||||||||
| 言語 | eng | |||||||||||||||||||||||||
| 資源タイプ | ||||||||||||||||||||||||||
| 資源タイプ識別子 | http://purl.org/coar/resource_type/c_6501 | |||||||||||||||||||||||||
| 資源タイプ | departmental bulletin paper | |||||||||||||||||||||||||
| ID登録 | ||||||||||||||||||||||||||
| ID登録 | 10.24514/00002662 | |||||||||||||||||||||||||
| ID登録タイプ | JaLC | |||||||||||||||||||||||||
| 著者 |
鈴木, 聡
× 鈴木, 聡
× 楠本, 憲一
× 柏木, 豊
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| 抄録 | ||||||||||||||||||||||||||
| 内容記述タイプ | Abstract | |||||||||||||||||||||||||
| 内容記述 | A gene trap vector for Aspergillus oryzae was constructed for use in comprehensive analysis of gene function. This vector, pPTR-EGFP1, has the egfp gene as a reporter gene preceded by a splice acceptor sequence, followed by A. nidulans sC gene terminator and pyrithiamine resistant gene (ptrA) as a selective marker in A.oryzae. This vector was integrated into a host genome randomly to create tag-line transformants. Approximately 300 pyrithiamine-resistant transformants were thus obtained, one of which trapped the 5' end of the coding region of yeast DUR3 homologue. Our results showed that pPTR-EGFP1 could be a useful tool in the gene function analysis of A.oryzae, namely, by isolating unknown genes by plasmid rescue and by trapping the endogenous promoter activity. | |||||||||||||||||||||||||
| 抄録 | ||||||||||||||||||||||||||
| 内容記述タイプ | Abstract | |||||||||||||||||||||||||
| 内容記述 | 麹菌Aspergillus oryzaeの包括的な遺伝子機能解析に資するため、新規のジーントラップ遺伝子破壊用プラスミドベクターを開発した。このベクター、pPTR-EGFPlはスプライス受容保存配列とA.nidulansのsC遺伝子ターミネーター配列を付加した緑色蛍光タンパク質遣伝子をレポーター遺伝子として保持し、麹菌で働く選抜マーカー遺伝子としてピリチアミン耐性遺伝子(ptrA) を保持する。このベクターを宿主麹菌のゲノムDNA内にランダムに挿入することにより、タグライン形質転換株を作成することができる。このベクターを用いた形質転換実験により、約300株のピリチアミン耐性株が得られ、そのうちの1株が酵母の尿素運搬体タンパク遺伝子に相同な遺伝子のコード領域の5'末をトラップしていた。本ベクターpPTR-EGFP1を用いることにより、形質転換株からのプラスミドレスキュー法による未知遺伝子の回収、及び内在性のプロモーター活性のトラップが可能となることが示され、麹菌A.oryzaeの遺伝子機能解析においてpPTR-EGFP1が有効に機能することが明らかとなった。 | |||||||||||||||||||||||||
| 書誌情報 |
食品総合研究所研究報告 en : Report of National Food Research Institute 巻 67, p. 33-38, 発行日 2003-03-01 |
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| 出版者 | ||||||||||||||||||||||||||
| 出版者 | 農業・食品産業技術総合研究機構 | |||||||||||||||||||||||||
| ISSN | ||||||||||||||||||||||||||
| 収録物識別子タイプ | ISSN | |||||||||||||||||||||||||
| 収録物識別子 | 0301-9780 | |||||||||||||||||||||||||
| DOI | ||||||||||||||||||||||||||
| 関連タイプ | isIdenticalTo | |||||||||||||||||||||||||
| 識別子タイプ | DOI | |||||||||||||||||||||||||
| 関連識別子 | 10.24514/00002662 | |||||||||||||||||||||||||
| 著者版フラグ | ||||||||||||||||||||||||||
| 出版タイプ | VoR | |||||||||||||||||||||||||
| 出版タイプResource | http://purl.org/coar/version/c_970fb48d4fbd8a85 | |||||||||||||||||||||||||
