@article{oai:repository.naro.go.jp:00002779,
 author = {鈴木, 聡 and SUZUKI, Satoshi and KUSUMOTO, Kenichi and 楠本, 憲一 and KUSUMOTO, Ken-ichi and 柏木, 豊 and KASHIWAGI, Yutaka},
 journal = {食品総合研究所研究報告, Report of National Food Research Institute},
 month = {Mar},
 note = {A gene trap vector for Aspergillus oryzae was constructed for use in comprehensive analysis of gene function. This vector, pPTR-EGFP1, has the egfp gene as a reporter gene preceded by a splice acceptor sequence, followed by A. nidulans sC gene terminator and pyrithiamine resistant gene (ptrA) as a selective marker in A.oryzae. This vector was integrated into a host genome randomly to create tag-line transformants. Approximately 300 pyrithiamine-resistant transformants were thus obtained, one of which trapped the 5' end of the coding region of yeast DUR3 homologue. Our results showed that pPTR-EGFP1 could be a useful tool in the gene function analysis of A.oryzae, namely, by isolating unknown genes by plasmid rescue and by trapping the endogenous promoter activity., 麹菌Aspergillus oryzaeの包括的な遺伝子機能解析に資するため、新規のジーントラップ遺伝子破壊用プラスミドベクターを開発した。このベクター、pPTR-EGFPlはスプライス受容保存配列とA.nidulansのsC遺伝子ターミネーター配列を付加した緑色蛍光タンパク質遣伝子をレポーター遺伝子として保持し、麹菌で働く選抜マーカー遺伝子としてピリチアミン耐性遺伝子(ptrA) を保持する。このベクターを宿主麹菌のゲノムDNA内にランダムに挿入することにより、タグライン形質転換株を作成することができる。このベクターを用いた形質転換実験により、約300株のピリチアミン耐性株が得られ、そのうちの1株が酵母の尿素運搬体タンパク遺伝子に相同な遺伝子のコード領域の5'末をトラップしていた。本ベクターpPTR-EGFP1を用いることにより、形質転換株からのプラスミドレスキュー法による未知遺伝子の回収、及び内在性のプロモーター活性のトラップが可能となることが示され、麹菌A.oryzaeの遺伝子機能解析においてpPTR-EGFP1が有効に機能することが明らかとなった。},
 pages = {33--38},
 title = {麹菌用ジーントラップベクター, pPTR-EGFP1の作成},
 volume = {67},
 year = {2003},
 yomi = {スズキ, サトシ and クスモト, ケンイチ and カシワギ, ユタカ}
}