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  1. INDEX:組織別
  2. 農研機構 畜産研究部門
  3. 研究報告
  4. 畜草研研報
  5. 4号

PCR法を用いたミツバチの簡略な種判別法

https://doi.org/10.24514/00001996
https://doi.org/10.24514/00001996
f8ff9e61-534f-4ccb-bdb9-b1ffc272fdf5
名前 / ファイル ライセンス アクション
ilgs_report_No4p1-5p.pdf ilgs_report_No4p1-5p.pdf (4.9 MB)
Item type 紀要論文01 / Departmental Bulletin Original Article(1)
公開日 2019-03-22
タイトル
タイトル PCR法を用いたミツバチの簡略な種判別法
タイトル
タイトル A Simple Technique Based on PCR to Distinguish Honeybee Species
言語 en
言語
言語 eng
キーワード
主題Scheme Other
主題 Apis
キーワード
主題Scheme Other
主題 mtDNA
キーワード
主題Scheme Other
主題 PCR-RFLP
キーワード
言語 en
主題Scheme Other
主題 Apis
キーワード
言語 en
主題Scheme Other
主題 mtDNA
キーワード
言語 en
主題Scheme Other
主題 PCR-RFLP
資源タイプ
資源タイプ識別子 http://purl.org/coar/resource_type/c_6501
資源タイプ departmental bulletin paper
ID登録
ID登録 10.24514/00001996
ID登録タイプ JaLC
著者 リーラマニット, ウィチェット

× リーラマニット, ウィチェット

リーラマニット, ウィチェット

ja-Kana リーラマニット, ウィチェット

en LEELAMANIT, Wichet

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ブーンヨム, レルングウィット

× ブーンヨム, レルングウィット

ブーンヨム, レルングウィット

ja-Kana ブーンヨム, レルングウィット

en BOONYOM, Rerngwit

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パニム, サコール

× パニム, サコール

パニム, サコール

ja-Kana パニム, サコール

en PANYIM, Sakol

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レデイ, チャンドラセカヤ

× レデイ, チャンドラセカヤ

レデイ, チャンドラセカヤ

ja-Kana レデイ, チャンドラセカヤ

en REDDY, Chandrasekhara

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シン, マン

× シン, マン

シン, マン

ja-Kana シン, マン

en SINGH, Man

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林, 武司

× 林, 武司

林, 武司

ja-Kana ハヤシ, タケシ

en HAYASHI, Takeshi

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安江, 博

× 安江, 博

安江, 博

ja-Kana ヤスエ, ヒロシ

en YASUE, Hiroshi

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天野, 和宏

× 天野, 和宏

天野, 和宏

ja-Kana アマノ, カズヒロ

en AMANO, Kazuhiro

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抄録
内容記述タイプ Abstract
内容記述 Molecular tools such as polymerase chain reaction (PCR)-based techniques have been widely used to analyze the genetic diversity of many social insects. Since their society has a very complicated and hierarchical structure, honeybees (Apis) will become a good model to study the evolution of social insects. In this report, we demonstrated a simple PCR-restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) to distinguish different Apis species. In brief, mitochondrial DNA (mtDNA) was separately isolated from workers of five major honeybee species, Apis mellifera (Western honeybee), A. cerana (Eastern honeybee),A. dorsata (Giant honeybee), A. laboriosa (Himalayan giant honeybee), and A. florea (Dwarf honeybee), obtained from different geographical regions. Western and Eastern honeybees, A. dorsata and A. laboriosa, and A. florea were collected from Japan, Nepal, and India, respectively. The PCR technique was performed to amplify a 528-bp DNA fragment of the NADH dehydrogenase subunit 4 (ND4 according to A. mellifera’s mtDNA sequence). Following digestion of the individual PCR products with two restriction endonucleases, NdeI and MdeI, the digested DNA fragments were separated with agarose gel electrophoresis, stained with ethidium bromide and visualized over UV light. The results clearly indicated that this PCR-RFLP procedure was simple but sensitive and reproducible for the identification of the genetic variability among Apis species. Therefore, this procedure will be useful to confirm other techniques for the identification of honeybees.
抄録
内容記述タイプ Abstract
内容記述 社会性昆虫の遺伝的多様性の解析に, PCR法などの分子生物学的手法が幅広く用いられるようになってきている。社会性昆虫の中でも,ミツバチ(Apis 属)は,複雑な階層構造をもつ社会を構成し,社会性昆虫の進化研究の適当なモデルとなりうる。本報では,様々なミツバチの種を判別するための簡略なPCR-RFLP法を開発し,その有用性を示した。ミツバチの主要な5種であるヨーロッパミツバチ(A.mellifera),トウヨウミツバチ(A.cerana),オオミツバチ(A.dorsala), ヒマラヤオオミツバチ(A.laboriosa), ヒメミツバチ(A.florae)の働きバチを様々な地域で得た。ヨーロッバオオミツバチ,ヒマラヤオオミツバチ,ヒメミツバチはそれぞれ日本,ネパール,インドで採集した。これら5種の働きバチからミトコンドリアDNAを分離し,ヨーロッパミツバチの配列からプライマーを作製しPCR法を用いてNADH 脱水素酵素のサブユニット 4(ND4)を増幅した。さらに,それぞれのPCR 産物を2つ制限酵素NdelとMbolで分解し,DNA 断片をアガロースゲル電気泳動で分離して臭化エチジウムで染色した後,紫外線でバンドを検出し,DNA断片の長さから種判別を行なった。この開発されたPCR-RFLP法は簡略であるが,再現性があり,ミツバチ種の間の遺伝的な変異の検出に有効でることが明らかになった。したがって,この手法は他のミツバチ種の判別技術を補完するものとして有用であると考えられる。
書誌情報 畜産草地研究所研究報告
en : Bulletin of National Institute of Livestock and Grassland Science

巻 4, p. 1-5, 発行日 2003-12-19
出版者
出版者 独立行政法人 農業技術研究機構
ISSN
収録物識別子タイプ ISSN
収録物識別子 1347-0825
DOI
関連タイプ isIdenticalTo
識別子タイプ DOI
関連識別子 10.24514/00001996
著者版フラグ
出版タイプ VoR
出版タイプResource http://purl.org/coar/version/c_970fb48d4fbd8a85
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Ver.1 2023-05-15 16:00:44.538684
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LEELAMANIT, Wichet, BOONYOM, Rerngwit, PANYIM, Sakol, REDDY, Chandrasekhara, SINGH, Man, HAYASHI, Takeshi, YASUE, Hiroshi, AMANO, Kazuhiro, n.d., A Simple Technique Based on PCR to Distinguish Honeybee Species: 独立行政法人 農業技術研究機構, 1–5 p.

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