2026-03-14T20:25:41Z https://repository.naro.go.jp/oai

oai:repository.naro.go.jp:00001706 2023-05-15T15:28:50Z 87:639:640:134:327

Random Amplification DNA Fingerprintingによる牛乳房炎主要原因菌種の同定 Application of random amplification DNA fingerprinting for identification of bacteria isolated from bovine mastitis 勝田, 賢 カツダ, ケン KATSUDA, Ken 江口, 正志 エグチ, マサシ EGUCHI, Masashi 坪井, 孝益 ツボイ, タカミツ TSUBOI, Takamitsu 横山, 隆 ヨコヤマ, タカシ YOKOYAMA, Takashi 西森, 敬 ニシモリ, ケイ NISHIMORI, Kei 内田, 郁夫 ウチダ, イクオ UCHIDA, Ikuo 田中, 聖 タナカ, キヨシ TANAKA, Kiyoshi 西森, 知子 ニシモリ, トモコ NISHIMORI, Tomoko 今井, 邦俊 イマイ, クニトシ IMAI, Kunitoshi A polymerase chain reaction-based DNA fingerprinting system for species identification of bacteria isolated from mastitic milk was developed using random amplified polymorphic DNA. A total of 662 isolates belonging to coliforms, Staphylococcus, Streptococcus, and Enterococcus species were used to develop the system. It is apparent from the present study that primer OEP-04 generated DNA fragments that can be used for differentiation and identification of members of the genera Staphylococcus, Streptococcus and Enterococcus species. The RAPD analysis of coliforms species using primer AP-45 has shown promising results for differentiation and identification of those bacteria. This technique is cost effective, simple to perform and may be adopted as a fast and easy identification technique by other laboratories involved in diagnosis of mastitis pathogens when a dedicated analysis software is developed in the future. Random Amplification DNA Fingerprinting（RAPD）法により乳房炎主要原因菌であるブドウ球菌, レンサ状球菌, 大腸菌群の同定方法を検討した. 乳房炎乳汁から分離されたレンサ状球菌（8菌種；296株）, ブドウ球菌（9菌種；215株）, 大腸菌群（8菌種；151株）を市販簡易同定キットで同定し, 選定したプライマーを用いてRAPD法を実施した. その結果, ブドウ球菌およびレンサ状球菌の菌種識別に有望なプライマーOEP-04（gTgACATgCC）, 大腸菌群の菌種識別に有望なプライマーAP-45（gTCAACgAAg）を得ることができた. 供試レンサ状球菌は全て識別されたが, 供試ブドウ球菌中Staphylococcus hyicus とStaphylococcus simulans は識別できなかった. しかし, これら2菌種は他の供試ブドウ球菌と識別された. 供試大腸菌群のうちSerrataia marcescens は菌種に共通な遺伝子増幅産物は認められず, この菌種の識別に選定したプライマーによるRAPD法の応用は不可能と考えられたが, 他の7菌種はRAPD法により識別可能であった. 以上のことから, 一部の例外を除き, RAPD法により乳房炎主要菌種の同定は可能と考えられる. 独立行政法人 農業技術研究機構 動物衛生研究所 2002-03-31 jpn departmental bulletin paper VoR https://doi.org/10.24514/00001662 https://repository.naro.go.jp/records/1706 10.24514/00001662 10.24514/00001662 1347-2542 動物衛生研究所研究報告 Bulletin of the National Institute of Animal Health 108 1 7 https://repository.naro.go.jp/record/1706/files/niah_report_No108p1-7p.pdf application/pdf 45.6 kB 2019-03-18